藻红蛋白(R-phycoerythrin ,R-PE)是从红藻中分离提纯的一种荧光蛋白,最大激发波长为565nm,最大荧光发射峰为575nm。由于其吸光度和荧光量产率很高,荧光强而稳定,灵敏度高备受免疫检测标记领域青睐。R-PE蛋白的亚基组成为(αβ)6γ,每个α、β亚基分子量为20KDa,每个γ亚基分子量为30KDa,总分子量为240kDa。目前还没有办法通过重组蛋白表达量产,只能从红藻中提取,因此其生产成本制约其广泛使用。
藻红蛋白标记抗体
1)取待标记抗体(纯度>90%),用标记缓冲液调整浓度到 5mg/ml左右为宜,按照每mg抗体加入2μl 抗体修饰试剂,轻轻混匀,在室温下避光晃动反应 90分钟;
2)反应完毕后,将其转入30KMWCO超滤管,用标记缓冲液超滤3次(每次管芯残留液体不超过原始液量1/4),得到修饰抗体;
2.活化R-PE蛋白与抗体偶联
1)用标记缓冲液复溶活化R-PE蛋白,浓度调整为5mg/ml;
2)将修饰抗体与活化R-PE蛋白,按照质量比1:3比例(每mg修饰抗体对应3mg活化R-PE蛋白)混合,室温避光反应2小时;
3)将封闭试剂管中加入5ul DMSO,;按照每0.5mg抗体5ul比例用量加入步骤2)反应产物中,封闭未反应完的活性基团;
4)标记好的抗体分装,加入适当保护剂,-20℃保存备用。
货号 |
产品名称 |
规格 |
ARL0022K-1 |
藻红蛋白抗体快速标记试剂盒 |
0.5mg |