产品信息
 
产品名称
产品编号
规格
价格（元）
CHO Host Cell DNA Residue Detection Kit
CHO宿主细胞DNA残留检测试剂盒
41301ES50
41301ES60
50T
100T
8,895.00
16,425.00
 
产品描述
 
CHO宿主细胞DNA残留检测试剂盒是用于定量分析检测各种生物制品的中间品、半成品和成品中的CHO残留DNA含量的试剂盒。
本试剂盒采用探针法荧光定量PCR原理，可专一快速的检测CHO细胞的残留DNA，其最低检测限可以达到fg水平。该试剂盒可与本公司的磁珠法残留DNA样本前处理试剂盒（Cat#18461ES/18462ES）配套使用。
 
产品组分
 
类别
组分编号
组分名称
产品编号/规格
41301ES50（50T）
41301ES60（100T）
Part I
41301-A
CHO qPCR mix
1 mL
2 mL
41301-B
DNA Dilution Buffer
2×2 mL
4×2 mL
Part Ⅱ
41301-C
CHO DNA Control（30 ng/μL）
25 μL
50 μL
【注】：本试剂盒不含ROX 参比染料，若您目前使用的Real Time PCR扩增仪需要添加ROX参比染料，推荐您购买本公司的50× ROX Reference Dye（Cat#10200ES）。
 
运输和保存方法
 
1. Part I 组分干冰运输，-20℃保存，有效期2年。
2. Part II 组分干冰运输，-80℃保存，有效期2年。
3. 收到货后，请检查Part I 和Part II共2个组分是否齐全，并立即放入对应的保存温度中储存。
 
注意事项
 
1. 使用本试剂前请仔细阅读本说明书，实验应规范操作，包括样本处理、反应体系的配制及加样。
2. 加样和配液步骤尽量都在冰上操作。
3. 每个组分在使用前都应充分震荡混匀，低速离心。
4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。  
5. 本产品仅作科研用途。
 
适用机型
 
包含但不限于以下仪器：
Bio-Rad：CFX96 Optic Module；
Thermo Scientific：ABI 7500；ABI Quant Studio 5；ABI Step OnePlus.
 
 
使用方法
 
一、CHO DNA定量参考品的稀释和标准曲线的制备
用试剂盒中提供的DNA稀释液将DNA定量参考品进行梯度稀释，稀释浓度依次为300 pg/μL、30 pg/μL、3 pg/μL、300 fg/μL、30 fg/μL、3 fg/μL。
具体操作如下：
1. 将试剂盒中的DNA 定量参考品和DNA稀释液置于冰上融化，待完全融化后，轻微振荡混匀，低速离心10 sec。
2. 取7支洁净的1.5 mL离心管，分别标记为 3 ng/μL，①，②，③，④，⑤，⑥。
3. 在标记为3 ng/μL的1.5mL离心管中加入90 μL DNA 稀释液和10 μL DNA 定量参考品（30 ng/μL），即稀释为3 ng/μL，振荡混匀后短时间快速离心10 sec，该浓度可分装置于-80℃短期保存（不超过3个月），使用时避免反复冻融。
4. 在 ①，②，③，④，⑤，⑥ 管中先分别加入90 μL DNA稀释液，再进行梯度稀释，稀释方法如下：
稀释管
稀释比例
终浓度
①
10 μL 3 ng/μL+90 μL DNA 稀释液
300 pg/μL
②
10 μL ①+90 μL DNA 稀释液
30 pg/μL
③
10 μL ②+90 μL DNA 稀释液
3 pg/μL
④
10 μL ③+90 μL DNA 稀释液
300 fg/μL
⑤
10 μL ④+90 μL DNA 稀释液
30 fg/μL
⑥
10 μL ⑤+90 μL DNA 稀释液
3 fg/μL
【注】：
1. 每个浓度做3个复孔，该试剂可测试3 fg/μL-300 pg/μL线性范围。若需要，可适当扩大或缩小线性范围。
2. 为减少反复冻融次数和避免污染，建议初次使用时将DNA定量参考品分装储存于-80℃。
3. 已融化未使用的 DNA 稀释液可保存于2-8 ℃ 7天，若长时间不用，请放置于-20℃。
4. 为确保模板完全混匀，每个梯度稀释时需轻微震荡混匀约1 min。
二、样本加标回收质控QC的制备
根据需要设QC中的CHO DNA标准品浓度（以制备加3 pg/μL DNA量的样本加标回收为例），具体操作如下：
1. 取100 μL待测样本加入1.5 mL洁净的离心管中，再加入10μL 溶液③，混匀，标记为加标回收QC。
2. 加标回收